南宫28NG相信品牌力量，我们为您提供的猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）是一款高效的检测工具，专门用于定性检测猪蓝耳病病毒。

产品概述

本试剂盒的产品名称为猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法），英文名称为Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)。每盒包含50个测试。

主要用途

本试剂盒基于实时荧光PCR技术，主要用于快速定位猪蓝耳病病毒，为疾病诊断及疗效评估提供重要的参考依据。

原理介绍

该试剂盒的设计基于猪蓝耳病病毒高度保守的基因区域，针对性地设计引物和探针。当样品中存在猪蓝耳病病毒基因组模板时，PCR反应即可进行，进而释放荧光信号，通过荧光定量PCR仪实时监测信号变化，实现有效的检测结果分析。

试剂盒成分

• 1. PRRSV RT-PCR反应液 875 μL x 1管
• 2. PRRSV混合酶液 125 μL x 1管
• 3. PRRSV阳性对照 40 μL x 1管
• 4. PRRSV阴性对照 40 μL x 1管
• 5. 说明书 1份

注：阴性对照为灭菌纯水，阳性对照为含猪蓝耳靶基因的质粒。

存储条件与有效期

试剂盒请在避光状态下、-20℃以下保存，避免反复冻融，保质期为12个月。

适用仪器

本试剂盒适用于ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid Smart Cycler及Rotor-Gene系列等多通道实时荧光定量PCR仪器。

样本要求

• 1. 血液或血清样品：使用无菌注射液抽取，置于离心管待检。
• 2. 肺脏、淋巴结、脾脏样品：取样本20g，加灭菌PBS磨成乳剂，并离心后取上清待检。
• 3. 避免样本间交叉污染。
• 4. 样本收集后可立即检测，若不能立即检测，可在2～8℃冷藏保存。
• 5. 长期保存需在-80℃以下冻存，避免反复冻融。

检验方法

1. 试剂准备：
   • 从冰箱取出试剂盒，融化混匀后瞬时离心。
   • 核算实验所需反应数，计算各种试剂量。
   • 在无菌离心管中加入试剂，混匀后瞬时离心。
2. 样本准备：
   • 使用QIAGEN或Roche RNA提取试剂盒提取RNA，按说明书操作。
3. 加样：
   • 在PCR反应管中分别加入处理好的RNA，每管5 μL，终体积25 μL，轻轻混匀后瞬时低速离心。
4. PCR扩增：
   • 将反应管放置于实时荧光定量PCR仪中，并记录放置顺序。
   • 按照说明书设置仪器并启动PCR扩增。

结果解读

结果由荧光信号检测分析，阳性标本的Ct值应≤35，而阴性标本的Ct值应＞38。本试剂盒的最低检出限为103 Copies/mL，CV值≤3%。

注意事项

• 实验室应符合相关管理规范，确保实验的有效性。
• 保持样本处理环境在0-4℃，完成后立即检测。
• 使用专用器具以避免交叉污染，并定期清洁工作台。
• 确保反应管密闭，操作时避免产生气泡。

南宫28NG相信品牌力量，致力于提供高效的疾病检测方案，帮助兽医及农场主更好地应对猪蓝耳病带来的挑战。