细胞转染概述及应用 细胞转染是将外源基因如DNA、RNA通过各种化学、生物学或物理方法导入真核细胞的一项关键技术。这一技术在生物医学研究中占据重要地位,广泛应用于以下多个领域:
研究基因功能 通过导入特定目标基因,可以使该基因过表达,从而研究其在细胞中的高表达对细胞功能的影响。此外,利用siRNA或shRNA使目的基因表达降低或不表达,进而研究基因缺失情况下对细胞功能的影响。
蛋白质表达与生产 通过转染编码目标蛋白的基因,可以进行蛋白质的表达与纯化。同时,通过融合荧光蛋白,可以研究目标蛋白在细胞内的分布及定位。
细胞工程 通过转染和筛选技术,可以获得能够稳定表达外源基因的细胞系,从而构建稳定转染细胞株。
药物筛选与毒性测试 通过转染特定基因,可以验证药物靶点的有效性。此外,利用高通量筛选可以找出潜在的药物。
基因治疗 通过导入或修复基因,可以治疗一些遗传病。同时,转染编码抗原基因可用于疫苗的研发。
细胞转染可以根据外源核酸在宿主细胞中的存在时间长短,分为瞬转和稳转:
瞬转:外源基因表达但不整合入宿主细胞基因组,细胞分裂后会逐渐丢失。
稳转:外源基因整合入细胞基因组,随细胞分裂持续表达,使得转染细胞的后代也能表达外源基因。
这两者之间的主要区别体现在目的及稳定性方面。瞬转通常用于短时间内获取高水平的基因表达,而稳转被用于获得稳定表达目的基因的细胞株。
转染方法主要分为物理介导法、化学介导法和生物介导法:
物理介导法:通过物理手段(如电穿孔法、显微注射法)将外源核酸直接导入细胞,效率较高,但可能对细胞造成较大损伤。
化学介导法:利用化学物质(如PEI、脂质体等)改变细胞膜的性质,从而促进基因转移。这种方法操作简单,但往往不能实现长期稳定的表达。
生物介导法:利用病毒作为载体包装外源基因,再将其导入细胞。这一方法可实现外源基因的长期稳定表达,但实验操作较为复杂。
由此可见,细胞转染的方法多样,选择适合的方法需考虑实验需求、实验室条件以及细胞类型和转染效率等因素。当前大多数实验室主要使用化学介导中的脂质体转染和生物介导中的慢病毒转染法。
南宫28NG相信品牌力量,以优秀的研究成果和服务声誉,提供多种细胞转染服务,包括慢病毒转染绿色荧光蛋白(ZsGreen)和红色荧光蛋白(mCherry、RFP)等近40种稳转细胞系。我们的服务范围广泛,可满足不同细胞类型的转染需求。
我们的服务编号包括:
- SNTS-L001:GFP稳转,获得GFP稳定表达细胞(3-4周)
- SNTS-L002:RFP稳转,获得RFP稳定表达细胞(3-4周)
- SNTS-L003:mCherry稳转,获得mCherry稳定表达细胞(3-4周)
- SNTS-L004:LUC稳转,获得LUC稳定表达细胞(3-4周)
- SNTS-L005:SV40永生,获得SV40永生化细胞(以原代细胞为主,6-8周)
选择南宫28NG,让我们助您在生物医疗领域取得更大的成功!