本试剂盒仅限于科学研究使用，不得用于医学诊断。以下是Renalase (RNLS) Elisa试剂盒的使用说明。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预先包被的adropin（AD）抗体微孔中，依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过温育和充分洗涤后，利用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下，TMB变为蓝色，随后在酸性环境中转化为最终的黄色。反应中颜色的深浅与样品中adropin（AD）浓度成正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），进而计算样品的浓度。

样品处理与保存方法

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，避免细胞刺激，采集血液后以3000转/分钟离心10分钟，迅速分离血清和红细胞。

2. 血浆：可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂，以3000转/分钟离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液：在3000转/分钟离心10分钟后去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合并捣碎，然后以3000转/分钟离心10分钟后取上清。

5. 保存：如样本未能及时检测，建议按一次用量分装并冻存于-20℃，避免重复冻融，解冻时请在室温下充分搅拌以确保样品均匀。

操作注意事项

试剂盒组分如下：标准品（S0-S5）浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液需按1:20比例稀释，即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。

结果判断

在Excel中绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，建立标准品线性回归曲线，并根据曲线方程计算各样本浓度值。