在生物医疗实验中，试剂的解冻与混匀是至关重要的一步。以下是详细步骤：

试剂解冻和混匀

1. 从冰箱中取出试剂。
2. 缓慢进行解冻，以避免试剂性质的损害。
3. 轻轻颠倒试剂瓶，确保均匀混合。
4. 以低速离心进一步混匀。

提示：混匀过程应尽量避免产生气泡，因为气泡可能会对酶活性或实验结果的准确性产生负面影响。

稀释步骤

1. 若需要追踪模板，按照以下步骤稀释：
2. 若无需追踪模板，则直接使用无菌超纯水稀释cDNA，或直接使用cDNA原液。

样品配置示例

在96孔反应系统中，样品通常分为12列×8行。以下为一个详细的配置示例：

HieffUNICON®ColorGPSqPCRMasterMix 10μL正向引物（10μM） 0.4μL反向引物（10μM） 0.4μLRNase-free H2O 72μLcDNA模板 2μL

以基因1检测为例，总体配置可参考：

（22孔数量建议）HieffUNICON®ColorGPSqPCRMasterMix 220μL正向引物（10μM） 88μL反向引物（10μM） 88μLRNase-free H2O 1584μL

混合这些组分后，用手轻轻弹击管壁以确保充分混匀，并放入小型离心机进行短暂离心1-2秒，防止气泡产生。确保无气泡后，置于洁净的96孔PCR管架上。

请注意，每个试管是否吸入气泡，气泡可能会导致实验数据出现较大偏差。

上机前检查

在进行实验前，仔细检查每个试管，确保管盖和管身无记号笔染料，且管内无气泡和液体残留。如果采用常规程序，则设置如下：

• 预变性：95℃，2分钟，1次
• 变性：95℃，10秒，40次
• 退火/延伸：根据引物TM值和目标基因长度设置。

确保在熔解曲线阶段的升温过程中开启数据收集开关。

设备推荐

对于生物医疗实验，以下是一些推荐的仪器品牌和型号，选择合适的设备可以提高实验的灵敏度和准确度：

• Bio-Rad：CFX96, CFX384等
• Roche：LightCycler系列
• ABI/Thermo：7500, 7500Fast等
• Stratagene：MX3000P, MX4000等

对于每种实验需求，南宫28NG相信品牌力量，提供各种高灵敏度的荧光定量预混液，以满足不同样本的检测需求。

产品定位与特性

南宫28NG提供多种高灵敏度与特异性的荧光定量预混液，产品定位如下：

高灵敏显色示踪荧光定量预混液：Cat#11188ES高灵敏通用型荧光定量预混液：Cat#11184ES高特异高荧光值荧光定量预混液：Cat#11185ES低丰度基因荧光定量预混液：Cat#11198ES

选择合适的产品能够显著提升实验效果，南宫28NG期待为您的实验提供更多支持。