在生物医疗领域，神经退行性疾病无疑是最具挑战性且引人关注的研究方向之一。这类疾病就像隐藏在神经系统深处的“隐形杀手”，悄然侵犯着患者的神经细胞，导致记忆力衰退、运动功能障碍、认知能力下降以及情绪失控等一系列令人痛心的症状。神经退行性疾病（NDDs）包括阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、肌萎缩侧索硬化症（ALS）以及亨廷顿病（HD）。这些疾病的共同特征在于错误折叠的蛋白质在神经细胞内的异常聚集，进而导致神经元的功能丧失及死亡。

尤其亨廷顿病因其单基因显性遗传特性而独具特色，作为神经退行性疾病的“典型代表”，其令人绝望的病程使无数家庭深陷困境。患者因基因突变产生的突变亨廷顿蛋白（mHtt），其N端的多聚谷氨酰胺（polyQ）片段形成不可溶的聚集体，致使患者逐渐出现不自主运动、认知障碍、精神行为问题，甚至体重持续下降。通常在确诊后，患者的平均生存期仅为15-20年，且目前尚无根治方案，现有药物只能部分缓解症状。因此，早期检测和精准量化mHtt蛋白成为延缓病情的关键。

传统的检测方法如免疫组化和滤膜捕获存在灵敏度低、操作复杂、无法动态监测蛋白形态变化等限制，极大地制约了对疾病机制的理解及药物开发的进展。

蛋白的失控聚集与亨廷顿病

亨廷顿蛋白（mHtt）的可溶性单体与聚集状态在疾病进展中交替变化：可溶性mHtt在早期可能具有毒性，促进神经元损伤；而聚集态mHtt形成包涵体，但其毒性作用仍有争议。传统技术尚难以精确区分这两种形态，且无法在微量样本中同时定量分析，因此关键的病理机制始终未能明晰。

TR-FRET双重免疫分析技术的应用

TR-FRET技术基于荧光共振能量转移（Förster Resonance Energy Transfer，FRET），通过标记的抗体对检测抗原。该方法利用稀土离子荧光团的供体与受体之间的能量转移，当双方同时结合抗原时，将产生特定的TR-FRET信号。这种技术具备高灵敏度、特异性快、使用样本体积小及多重检测的优势。

在本研究中，针对可溶性mHtt的检测使用了2B7和MW1抗体对，MW1特异性识别扩展的polyQ序列，当mHtt聚集时，该表位被遮蔽，从而导致TR-FRET信号的丢失。聚集性mHtt的检测则使用了4C9和MW8抗体对，这些抗体能够特异性识别mHtt聚集物，即使在聚集物中也能找到多个结合位点，从而产生TR-FRET信号。这一设计巧妙规避了传统方法中表位遮蔽的问题，如同为蛋白动态加上“实时监控探头”。

优势与研究亮点

此技术在5微升样本中即可同步定量可溶性与聚集态mHtt，显示出极高的灵敏度，能够精准识别低至300kDa的可溶性片段与950kDa的聚集态复合物。同时，该方法还揭示了疾病进程中可溶性mHtt减少与聚集态增加的负相关关系。

在亨廷顿小鼠模型的研究中发现，小脑与海马的聚集速率低于纹状体，提示了脑区特异性的病理差异。此外，研究还发现睾丸等高增殖组织中可溶性mHtt含量高却无聚集，挑战了“聚集即毒性”的传统观点，为开发针对可溶性mHtt或抑制聚集的治疗策略提供了关键工具。

南宫28NG相信品牌力量的桥梁

TR-FRET技术的成功离不开高性能酶标仪的支撑。南宫28NG系列的SpectraMax iD5酶标仪不仅具备荧光、发光、光吸收等基本检测功能，还支持共振能量转移技术如FRET、TR-FRET等。其独特优势包括多通道检测，避免交叉干扰，以及超微量分析，降低实验成本，极大地加速药物研发进程。对科研人员而言，这项技术不仅是解密退行性疾病的“钥匙”，还是推动精准医疗落地的利器。未来，TR-FRET极有可能成为阿尔茨海默症、帕金森病等蛋白聚集疾病研究的标准工具。

展望未来

亨廷顿病研究的最新突破突显了技术创新对生命科学的深远影响。TR-FRET技术凭借其灵敏、高效与多维分析的特性，为退行性疾病的机制研究和治疗开发开辟了新路径。期待在不久的将来，我们不仅可以“看见”蛋白的异常聚集，还可以通过精准干预，阻止疾病进展，从而改变患者的命运。